根据以下实验结果 推断肽的氨基酸排列顺序。 a.经酸水解分析该肽段含下列成分: ①Ala2;
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根据以下实验结果,推断肽的氨基酸排列顺序。 a.经酸水解分析该肽段含下列成分: ①Ala2;Arg;Met;Phe;Ser2;Lys2。 b.经羧肽酶A水解得:②Ala。 c.经胰蛋白酶水解所得各肽段成分分别为: ③(Ala;Arg);④(Lys;Phe;ser);⑤(Lys);⑥(Ala;Met;Ser)。 d.经CNBr水解所得肽段成分为: ⑦(Ala;Arg;Lys;Met;Phe;Ser);⑧(Ala;Ser)。 e.经嗜热菌蛋白酶水解所得肽段成分为: ⑨(Ala;Arg;Ser);⑩(Ala;Lys;Met;Phe;Ser)。
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参考答案
正确答案:蛋白质序列测定是研究蛋白质的基本技术之一。首先使用两种以上方法将蛋白质或肽降解成不同长度片段再通过Edman降解测定每一个片段的序列最后对比不同方法产生的肽段的序列拼接出原本的蛋白序列。在这中间必须弄清楚每种方法特异切割的位点。比如cNBr特异切割Met后的肽键羧肽酶A从羧基端逐步降解氨基酸胰蛋白酶水解Lys和Arg后的肽键嗜热菌蛋白酶水解Phe、Leu、Val、Tyr、Ile、Trp残基前的肽键。(1)由a条件可知该肽段为9肽;(2)由b条件可知该肽段的最后一个氨基酸残基为Ala;(3)由c条件可知⑥(Ala;Met;Ser)为最后一个肽段且其中Ala为最后一个氨基酸残基。③(Ala;Arg)可知片段的排列顺序为Ala—Arg;(4)由d条件CNBr水解可确定最后3个氨基酸残基的排列顺序为Met—Ser—Ala;(5)由e条件嗜热菌蛋白酶水解结果可知片段⑩序列应为Phe—Lys—Met—Ser—Ala③、⑨、④可重叠出片段序列为Ala—Arg—Ser—Phe—Lys将此序列和片段⑩重叠可获得该肽段的完整序列 Ala—Arg—Ser—Phe—Lys一Lys—Met—Ser—Ala。
蛋白质序列测定是研究蛋白质的基本技术之一。首先使用两种以上方法将蛋白质或肽降解成不同长度片段,再通过Edman降解测定每一个片段的序列,最后对比不同方法产生的肽段的序列拼接出原本的蛋白序列。在这中间必须弄清楚每种方法特异切割的位点。比如cNBr特异切割Met后的肽键,羧肽酶A从羧基端逐步降解氨基酸,胰蛋白酶水解Lys和Arg后的肽键,嗜热菌蛋白酶水解Phe、Leu、Val、Tyr、Ile、Trp残基前的肽键。(1)由a条件可知,该肽段为9肽;(2)由b条件可知该肽段的最后一个氨基酸残基为Ala;(3)由c条件可知⑥(Ala;Met;Ser)为最后一个肽段,且其中Ala为最后一个氨基酸残基。③(Ala;Arg)可知片段的排列顺序为Ala—Arg;(4)由d条件CNBr水解可确定最后3个氨基酸残基的排列顺序为Met—Ser—Ala;(5)由e条件嗜热菌蛋白酶水解结果可知,片段⑩序列应为Phe—Lys—Met—Ser—Ala,③、⑨、④可重叠出片段序列为Ala—Arg—Ser—Phe—Lys将此序列和片段⑩重叠可获得该肽段的完整序列Ala—Arg—Ser—Phe—Lys一Lys—Met—Ser—Ala。